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花卉组织培养技术
http://flower.intopet.com 日期:2006-6-16 来源:互联网 作者:佚名 阅读:
  1、花卉组织培养的应用价值

    花卉组织培养,就是分离花卉植物体的一部分,如茎类、茎段、叶、花、幼胚等,在无菌试管,并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件,使其产生完整植株。由于其条件可以严格控制,生长迅速,1-2个月即为一个周期,因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。

  快速大量繁殖方面:对一些难繁殖的名贵品种花卉及一些短期内大量急需生产的花卉,应用很广。兰花、菊花、唐菖蒲等花卉利用腋芽增生,短期得到大量植株。非洲紫罗兰可通过叶片,水仙可通地鳞片,诱导产生不定芽,来达到大量繁殖的目的。

  花卉育种方面:百合、鸢尾等许多花卉可以进行远缘杂交,由于生理代谢等方面的原因,常使杂种胚早期败育,因而得不到杂种植物。而在试管中进行胚培养,可使其顺利生长,得到远缘杂种。此外还可采用愈伤组织诱变、花粉培养等多种方法,来进行花卉育种。

  培育无病毒苗方面:菊花、唐菖蒲、水仙、郁金香、大丽花等一大批花卉靠无性繁殖法繁殖,病毒逐代传递积累,危害日趋严重。而分离花卉植物0.1-0.5毫米大小的生长点,培养得到的基本上是无病毒苗。因此这一技术已在花卉无病毒苗的培育中广泛应用。

  2、花卉组织培养对实验室及设备的要求

  花卉组织培养是在人工控制的条件下培养花卉,是一种花卉现代工厂化生产新技术,所以其对实验室及设备有一定的要求。

  实验室方面

  ①化学实验室:主要承担配制培养基的任务。要求具有各种化学药品试剂、各种玻璃器皿、称量天平等。

  ②洗涤室:主要进行玻璃器皿的洗涤,要求有自来水装置,同时有烘箱,以便洗后烘干。

  ③灭菌室:主要进行培养基和用具的消毒。要有高压灭菌锅,具有水源和电源。

  ④接种室:是花卉材料分离、消毒接种和转移的场所。要求密闭、清洁、整齐、装有紫外灯,能随时灭菌。有的也可用接种箱或超净工作台代替。

  ⑤培养室:是花卉材料培养生长的地方。要求清洁,保温好,室温均匀一致,并有绝热、防火性能。

  设备方面

  ①天平:供配制培养基时称量药品和激素用。大量元素用普通天平;微量元素和激素用分析天平。

  ② 酸度计:测定培养基的pH用。

  ③高压灭菌锅:是供培养基和器械用具灭菌用。

  ④烘箱:洗净的玻璃器皿干燥灭菌用。

  ⑤蒸馏水制造装置:得到纯净水供培养用。

  ⑥冰箱:供贮放母液和植物材料用。

  ⑦接种箱或超净工作台:为植物材料接种或转移的操作场所。

  ⑧空调机:控制室温用。

  3、花卉组织培养对培养基的要求

  培养基是花卉植物组织培养中十分重要的基质,目前应用的有好多种,但其主要成分大体相同,主要成分是水,其他还有大量元素、微量元素、维生素、生长调节物质、蔗糖和琼脂等。

  目前花卉组织培养中应用最多的为MS培养基。其组成是在配制1升(1000毫升)培养基时,加硝酸铵1.65克、硝酸钾1.9克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸镁22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克、氯化钴0.025毫克、硫酸铁27.8毫克、蔗糖30克和琼脂7克。其他生长调节物质要根据花卉的种类和培养目的而确定。MS培养基中大量元素浓度过高,为此常采用1/2、1/4大量元素浓度作培养用,这样生长效果列好。

  配制培养基前要准备好三角瓶、试管、烧杯、量筒、吸和等玻璃器皿,预先称好药品。配制时先将琼脂溶化,再加入在水中深解的各种营养元素和蔗糖,然后用氢氧化钠或盐酸调整培养基的pH,一般掌握在5.7左右。以后可分注到养瓶中,盖好瓶盖。培养基配好要经高压灭菌。冷却后放到培养室预培养3天,如没有杂菌污染,才可进行花卉材料的接种。

  4、花卉组织培养的过程

  花卉植物组织培养即无菌培养,也就是要求培养的材料不带有杂菌。从田间或温室等地切取花卉材料时,应选择健壮无病虫母株,取幼嫩、分生能力强的部位,以利生长。

  取来的材料虽经选择,外部总还有不少杂菌。为此,接种前应进行表面灭菌。通常先用自来水冲洗十几分钟,有泥的应刷去。冲洗干净后,用70%的酒精浸泡10-15秒钟消毒。接着用无菌水(经高压灭菌的蒸馏水)冲洗两次,再用10%的漂白粉澄清液浸泡20分钟消毒,最后用无菌水冲洗3-4次。带有茸毛不易湿润消毒的材料可加些洗衣粉。上述操作皆应在接种箱或超净工作台等无菌环境条件进行。经过表面灭菌的材料,用无菌滤纸将水吸掉。再用

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