兰花,国人尊为“国香”。名兰价位高,数量少,繁殖系数低,栽培也较困难,故此,在建立名兰兰圃的工作中,生物技术大有用武之地。我们用茎尖培养技术繁殖了十几种名兰和叶艺品种,解决了一系列技术问题,实现了小批量商品化生产。下面以四川名兰“隆昌素”和中国名兰“宋梅”为例,报告我们在建立名兰试管苗兰圃,探索农业生物技术产业化问题上的进展。 一、试验材料筒介 “隆昌素”。叶4—6枚丛生,叶片长30—45厘米,叶梢弯垂;2月始花,花草直立,着花2—3朵,瓣微绿,心乳白,花色素雅,香味纯正,曾在国内外兰展中夺魁。隆昌素对栽培条件要求较高,用传统方法栽培繁殖系数较低。 “宋梅”,是最著称的梅瓣型兰花,居四大名兰(宋梅、龙字、集园、汪字)之首。此花于清乾隆年间由绍兴宋锦旋发现,迄今已逾二百年。 二、试验技术及结果 1.茎尖培养诱导原球茎的产生: 诱导原球茎的培养基如下: 隆昌素:基本培养基为稍加改动的MS(1962)配方,每升补加N八人0.1至0.5毫克,BA0.5—2毫克,AS20毫克,叶酸0.5毫克,生物素0.1毫克,椰乳100毫升,人参粉1克,活性炭1克等。 宋梅:基本培养基同上,每升增补NAA4,BA2—3毫克,AS20毫克,CM100毫升,LH500毫克,活性炭1克等。 在严格的无菌条件下,剥取0.1—0.2毫米的带一个叶原基的茎尖,接种于培养基上。外植体在一到三个月后形成绿色原球茎,随后缓缓长大并增殖形成根状茎式样。 2,原球茎的增殖和无性繁殖系的建立: 切取呈根状茎式生长的原球茎移人每升加0.5毫克NAA,0.5毫克BA,500毫克LH和1克活性炭等的MS培养基中。原球茎边增殖边分化,可将分化产生的小苗移人壮苗培养基中。而让新生的原球茎在同一种或另一种培养基(如复壮培养基)上继代培养,不断增殖。每月可增殖2—3倍。 3.芽的分化: 若要使原球茎全部分化成芽,通过调整激素浓度和配比即可实现。 4.复壮: 长期培养容易导致根状茎变细、苗子变小、变弱、生长缓慢、抗逆能力降低,致使移出管外的苗子适应性差不易成活。我们采用复壮原球茎和壮苗两种方法,复壮后的原球茎不但外观改善,干物质也比对照增加19.4%。两年中经壮苗培养的8批560余管(瓶),其根系发达,苗子健壮,与对照相比,根量增加94%,根长增加132%。 5.试管苗的栽培: 成功的试管苗移栽和管理技术是科研产品能否成为商品进入市场的关键。我们花费两年时间研制出了能使移栽成活率达100%的由六个条件和八个技术环节控制的关键技术组合。六个条件是:①、出管苗的良好状态,②、保湿,②、控温,④、合适的栽培介质,⑤、使用全新配制的全价营养液,⑤、改变光照质量。八个技术环节是:①、小苗栽前预处理技术,②、上盆技术,③、栽后阶段管理技术,④、根芽生长促控处理技术,⑤、转换栽培介质技术,⑤、水肥管理新方法,⑦、病虫害防治技术,③、控制越冬休眠技术。 经我们栽培或处理的隆昌素小苗不论是土栽还是无土栽培都容易成活并容易发新芽,不少人的栽培成活率也很高。唯一遗憾的是,它们和祖辈一样,管理稍有失当便容易干尖。宋梅叶片坚劲,不易出这类问题。 6.试管苗均已开花,色、香、型正常。 本项研究成果在1994年举行的“第四届中国兰花博览会暨94四川国际兰展”获博览会金奖。