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兰花的试管无性繁殖
http://flower.intopet.com 日期:1996-8-20 来源:中国花卉报 作者:柴明良 阅读:

兰花是单子叶植物,比双子叶植物的组织培养要困难得多;其次,兰花在自然生长中通常需共生真菌提供某些营养,因此需在培养基中添加B族维生素以代替真菌的作用;再次,兰花形态发生较特殊,要从成龄兰株丛基部的假鳞茎上取侧芽或取花序等培养。这些组织在培养中要经历与兰花胚发育相似的过程。通常先形成原球茎(Protocorm)随后再发育成一棵小植株。原球茎是兰花较原始程度的非常幼小的芽,再生能力强,可切割分离不断增殖,从而形成大量遗传一致的材料。采用分生组织繁殖的另一个优点是再生植株通常不含病毒。掌握这些要素是试管繁殖兰花能否成功的首要条件。 操作过程。从植株上分离假鳞茎,仔细去除老叶和坏死组织,使带分生组织的侧芽露出,此时分生组织仍包被着小叶。在超净台上用解剖刀切下侧芽,用75%酒精处理10秒钟,然后移出,抖去多余的酒精,浸入次氯酸盐溶液中25分钟,接着用无菌水冲洗3遍。在消毒过的培养皿中仔细地切去幼叶和鳞叶后,将芽在75%酒精中过一下,再用无菌水冲洗。将这带2至3个叶原基的分生组织在解剖显微镜下用锋利的解剖刀除去剩余的叶原基,将分离出的幼小的分生组织接入试管中。在25℃下连续光照培养,光强2000勒克斯。如果分生组织未受损伤,约8天后就会转绿,2周后就能发育成一个完好的原球茎。待原球茎充分发育后,可切成4至6片,然后重新接入培养基,每块组织会很快地发育成一个新的原球茎。以后多次重复以扩大数量。 培养基为Knudson、Morel、White等,目前常用者则为MS和B5。不同属、种兰花培养的难易相差很大,所以要根据材料的要求添加植物生长调节物质,一般为NAA0.5至1.0毫克/升;BA0.1至1.0毫克/升。必要时还需添加椰乳、香蕉和苹果汁等,以满足其对特定成分的要求。

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