采用组培快速繁殖菊花,不仅可在短时间内大量繁殖名优特稀品种,而且可以生产无毒种苗,恢复传统优良品种的种性,提高花卉生产的产量和品质。
将菊花茎尖、带腋芽的茎段用自来水冲洗10分钟后,用蒸馏水冲洗2次,再用清洁滤纸将表面水分吸干,用70%的酒精消毒30秒钟,再用0.1—0.2%升汞溶液浸泡10—15分钟,在无菌条件下,用无菌水冲洗3—4次后,将其切成1厘米左右的小段。按其极性方向接到诱导分化培养基MS+BA
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+NAA0.2(毫克/升,下同,pH5.8)上,放入25—28C,光照强度1000—2000勒克斯,每天12小时光照的培养室中培养。10天后基部产生大量愈伤组织,苗也增高2倍以上。两周后愈伤组织逐渐转绿,此时便可将其转入增殖培养基MS+BA
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,两周后便生出大量丛芽,普遍4—6个,最多的达10个以上,芽高2—4厘米。注意转接每团愈伤组织都应带一个芽或一片叶,纯愈伤组织在该培养基上很难分化为丛芽。为了避免反复使用一种培养基,使增殖和生长能力减弱,连续增殖继代时,可在MS+BA
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+NAA0.2和MS+BA
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上交替进行,用不同激素和浓度交替刺激,便能维持旺盛的分化和生长活力。
生根培养我们选用的是MS+NAA0.4+蔗糖4%和1/2MS+NAA0.4+蔗糖3%两种培养基。一周后两种培养基都开始生根,两周后两种培养基的生根率都达100%。但前者根苗生长都较后者粗壮,根毛也较后者发达。两周后便可出瓶移栽。移栽地苗高2—3厘米,每苗4—10条根,根长2—3厘米,根苗比重约为1/2。
移栽基质我们选用的是珍珠岩粉,既能保湿又能透气,有利于根苗生长。栽前打开瓶口炼苗2—3天,栽时洗净根部培养基,栽后浇足定根水,盖上薄膜以保持湿度(每天应有一定换气时间),避免阳光直接照射。两周后可以不用盖膜,每隔3—5天用1/4—1/2的MS
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营养液叶面喷施以增加营养,30—40天便可定植到大田或上盆。定植前应在接近定植的环境炼苗2—3天,定植成活率可达90%以上。